摘要:目的:比较常规人工显微镜方法精液分析技术与计算机辅助精子质量分析(CASA)检测各项参数的可信度。方法􀀁随机选择200份精液标本,在进行CASA检测的同时进行人工显微镜分析。人工方法按WHO规定的标准方法进行检测,CASA采用捷达公司提供的计算机辅助精液分析系统。结果􀀁两种方法对106份指标正常精液和94份指标异常精液标本的精密度分析结果差异无统计学意义,对精子运动的分析表明CASA方法优于人工显微镜法。结论:CASA系统提供了标准、完善、快速、精确的评定结果。
　　
　　关键词􀀁精液/化学;􀀁精子;􀀁诊断试剂盒;􀀁显微镜检查
　　
　　精子在垂体前叶素的刺激作用下由睾丸曲细精管自精细胞产生,曲细精管的弯曲部分有好几层来自生发上皮,这些细胞以后就依次形成精子。健康人每次排精量大约3~6mL,色灰或略带黄色,不透明,黏稠质厚。30min内自行液化,pH为7.8,每毫升精液约含1.0~1.5亿个精子,形状分为头、体、尾,运动活泼。精液质量分析是判断和评估男性生育能力最基本、最重要的方法。传统手工方法对精液质量分析缺少量化的判断指标。计算机辅助精子质量分析(CASA)系统将现代化的计算机技术运用于精子质量的临床分析中,对精子的密度、活力、活率、运动轨迹等几十个项目进行自动化定性、定量分析。现采用CASA对本科室随机选择的200份精液检测标本进行量化分析,并与光学显微镜方法进行比对,报道如下。
　　
　　1􀀁资料与方法
　　
　　1.1􀀁检测对象􀀁本院男性科门诊200例随机患者。
　　
　　1.2􀀁标本采集􀀁精液标本由男性科门诊提供,患者禁欲3~5
　　
　　d用手淫方法取精。
　　
　　1.3􀀁仪器􀀁CASA系统精子计数板,CX􀀁21Olympus显微镜。
　　
　　1.4􀀁方法
　　
　　1.4.1􀀁标本检测􀀁待测标本36.5~37.0!孵育,记录液化时间、精液量、外观及pH值。
　　
　　1.4.2􀀁人工显微镜检测􀀁将上述处理的精液标本加样于37!预热的Hukler计数板及干净载玻片上,由经验丰富的专业人员严格按文献[1]方法进行精液常规分析,记录精子密度、活力及活动率。
　　
　　1.4.3􀀁CASA检测􀀁同一份精液标本分别在100倍和200倍显微镜下连续测定5次,确定CASA系统的可重复性。记录200例男性患者精液CASA检测结果分类及比率。
　　
　　1.5􀀁统计学分析
　　
　　1.5.1􀀁CASA可重复性测定􀀁对连续5次测得的精子密度、精子活动率、精子A+B活动参数的变异情况进行统计学分析,对100倍和200倍放大倍数检测结果的一致性用t检验进行验证。
　　
　　1.5.2􀀁相关性与准确度比对􀀁用相关分析方法评价人工显微镜方法检测的参数及精子质量,评价CASA检测系统获得的数据与对应参数的相关关系。人工显微镜法与CASA检测系统两种方法检测结果差异的显著性用配对差值、均值的t检验。
　　
　　2􀀁结果
　　
　　2.1􀀁CASA系统对200例门诊随机标本检测结果的分类及比
　　
　　率􀀁见表1。
　　
　　表1􀀁200例随机患者精液CASA系统检测结果
　　
　　精液分类n比率(%)
　　
　　正常精液10653
　　
　　少精子症2613
　　
　　无精子症105
　　
　　弱精子症5829
　　
　　2.2􀀁CASA系统精液质量的重复性测定􀀁见表2。结果显示CASA系统检测的精子密度、活动率及A+B活力数据的变异性很好,分别为100倍:1.63、1.94、2.84;200倍:1.70、2.15、3.02。两个放大倍数的一致性测定数据显示CASA检测系统具有稳定、良好的重复性(P>0.05)。
　　
　　2.3􀀁两种方法精液质量分析主要参数的相关性比较􀀁人工显微镜方法分析的参数与CASA系统测定精子密度、活动率及A+B活力高度相关(r>0.9),说明CASA检测系统与人工显微镜检测结果相比有较好的相关性。见表3。
　　
　　表2􀀁CASA系统精液质量的重复性分析
　　
　　项目
　　
　　放大100倍
　　
　　xsCV%
　　
　　放大200倍
　　
　　xsCV%
　　
　　P
　　
　　精子密度(∀106)13.480.221.6313.490.231.70>0.05
　　
　　精子活率(%)23.640.461.9423.680.512.15>0.05
　　
　　A+B级精子(%)21.820.622.8421.880.663.02>0.05
　　
　　􀀁􀀁注:CV表示变异系数。
　　
　　表3􀀁两种方法精液质量分析主要参数的相关性比较